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知識を秘蔵せし書庫への質問 以下の内容は、天空の戦い終了直後に行われた「知識を秘蔵せし書庫」への質問の要約です。 量が膨大な為、抜けや見落としなどがありましたら、ご指摘頂けると助かります。 また、一部に内容が重複している項目に関しては、記述する事で分かり易くなると判断し、意図的に「重複して記述」を行ったものもありますので、ご了承下さい。 知識を秘蔵せし書庫について ランドルフについて神秘根絶について ジハードについて ディアボロスランサーについて メガリスについて聖杯について 神の左手について 世界結界とシルバーレインについて ティンカーベルと、ティンカーベルの持ち物について 封神台と神将について マヨイガについて プラトン立体について 闘神の独鈷杵について 鉄鎖レージングについて 殺生石について 鬼の手について 燕の子安貝(ゾアン・クラム・アグゼ)について ゴーストについて 抗体ゴーストと抗体兵器について 異形について二つの三日月について 生と死を分かつものについて 無血宰相トビアスについて 水晶剣ルルモードについて セイクリッド・ダークネスについて デッドエンドについて デッドエンドデッドについて 妖狐について金毛九尾について 吸血鬼について伯爵について 土蜘蛛について ルナエンプレスと月の民について 平家について ナイトメアについて 人狼について 生命使いと生命賛歌について 白燐蟲使い、黒燐蟲使いについて 除霊建築士について 朱雀拳士、玄武拳士について その他の能力者や来訪者について 使役ゴーストについて 見えざる狂気について その他、未分類 知識を秘蔵せし書庫について 誰が作ったか、どのような目的で作られたのか、何故全ての知識を秘蔵しているのかなどの質問に対しては「そのような存在だから」の答えのみ。 そのような存在である為、自らの消滅を止める事もできず、それを防ぐ方法も無い。また、知識を簡単に消えない程度に丈夫な別の媒体に出力する事もできない。 消滅した後に、再度、出現する可能性は0では無いが、その時の知識を秘蔵せし書庫は、今の知識を秘蔵せし書庫とは別の存在。 ランドルフは知識を秘蔵せし書庫を使用していない。 情報が古かったり、知識が間違っている可能性、知らない知識がある可能性は否定しなかった。 情報は「登録されている」訳では無い。 ランドルフについて 知識を秘蔵せし書庫は使用しなかった。 聖杯からもたらされた知識(情報)は、真実とそうでないものの両方があった。その情報は神の左手を手に入れる事で、他の者も知る事が可能。 神秘根絶は「自らの意思」で行っていた。 100人の賛同者と共に戦場を去っていた場合、「異形の殲滅」と「完全なる世界結界の創造」を目的として行動していた。 神秘根絶について 神秘根絶で消える神秘とは、「生命以外の全て」。 生命である「能力者」は、死亡するものもいれば、死亡しないものもいた。「世界結界の術者でない者」は死亡し、「銀誓館学園で力を継承者して引退した者」は生き残っていた。 神秘根絶儀式の行い方は、神の左手を所有する事で知る事ができる。 神秘を根絶しないと、生命が死滅する訳では無い。 ジハードについて ジハードへの妨害を行っていたのは金毛九尾。 ディアボロスランサーについて メガリスを生み出した存在で、メガリスとは異なる。 神の左手以外でディアボロスランサーを使う方法は無いが、破壊する事は可能。破壊された場合、生命を存続させる方法は存在しない。 ディアボロスランサーの破壊以外の生命根絶の方法は無い。 この世界にディアボロスランサーをもたらした存在については、「この世界の者は、それを知る事ができない」と回答。「この宇宙の知識にその情報は存在しない」との事。 地球に存在していたのではなく、停止した場所が地球だった。 ディアボロスランサーは複数存在せず、別の宇宙や世界に似たようなものも存在しない。 神秘根絶以外には、「生命根絶」と「世界結界の創造」が可能。 起動したディアボロスランサーを止める方法は1.起動させたものが死ぬ2.起動させたものが止めるかのどちらかのみ。 二つの三日月とは「因縁を持つ二者」と言う関係。 来訪者はディアボロスランサーを欲している訳では無い。 神将「都怒我阿羅斯等」がディアボロスランサーを求めていた理由は、力を求めていたから。 対になる「死を司るもの」のようなものは無い。あるとすれば、この世界そのもの。 異形の発生には、ディアボロスランサーが生命を生み出した事も影響している。 ディアボロスランサーの「生命の根源力」を分割して、全ての生命に与える事はできない。 メガリスについて メガリスとは、ディアボロスランサーより生まれたもの。戦いの結果生まれたとされているが、その「戦い」に関しての情報は未出。ディアボロスランサーと「強き力の衝突」により生じたとの回答も。 偶発的に生み出されるものであり、意図的に作る事はできない。但し、新たなメガリスを作る事は不可能ではない。 同一のものを作る事もできないが、似たようなものであれば、作り上げる事はできるかも知れない。 現在の総数は「624」個。内、地球上に存在するものは「127」個。誰も所有しておらず、学園が入手できそうなメガリスも存在する。 異形が使用した場合も代償は発生しているが、別の方法でその代償を支払っている。 メガリスの破壊効果は、組織の傾向によって決定される。現在の組織を維持したまま、破壊効果を変える事はできない。 メガリスアクティブには、「後天的になる」事も可能。 最近のメガリスの効果の変化は、ディアボロスランサーの胎動による影響。但し、効果を変化させても、性質が変わった訳では無い。 メガリスがイグニッションカードに入ったのは、メガリスが所有者として認めたから。 イグニッションカードの中のメガリスの力を強くしたり、元の力を引き出すようにするには、使い方を工夫するしか無い。真にそれが必要であれば、そうなるだろう。 長期に渡って効果を及ぼすメガリスの代償の中には、時間で解決できるものもある。 聖杯について ディアボロスランサーの力を引き出し(操作し)、世界結界を作る効果を持つ。 ランドルフに与えた情報は、真実もあれば、そうでない情報もあった。世界結界に関する情報は、全て伝えている。 新たに聖杯を作る方法は無い。 聖杯による天啓(天啓巡礼士の天啓)と、異形「セイクリッド・ダークネス」の天啓の関連性は無い。 聖杯自身に意思は無い。 神の左手について 神の左手を使う事で、ディアボロスランサーの使い方も知る事ができる。 神の左手を利用して、「生命根絶儀式」を執り行う事は可能。 神の左手自体が「神秘根絶の力」を持つ訳では無い。 「神の右手」は存在しない。 現在、神の左手は宇宙にあり、所有者は不在。移動を続けているが、物理的に回収する事が可能な状態。 神の左手を呼んだのは「宇宙」。 巡礼士の本業能力「聖杯探索」で探す事はできない。 神の左手を所有する事ができるのは、所有する資格があれば良い。必ずしも「聖杯のメガリスアクティブ」である必要は無い。 「神の島」や「量産型巡礼士」を初めとした存在は、全て「聖杯のメガリスアクティブ」が神の左手を使用した事で生まれ、コントロールする事が可能だった。 世界結界とシルバーレインについて 神秘根絶の過程で生み出された「シルバーレイン」は、世界結界が姿を変えたもの。 現在の世界結界の強度は「67%」。完全な世界結界があれば、あらゆる神秘は封印される。 世界結界の外から「詠唱銀」と共に降り注ぐ「シルバーレイン」と、神秘根絶を目的とした「シルバーレイン」は同質のもの。組み合わせても意味は無い。 「シルバーレイン」には、詠唱銀をもたらす事、神秘を拒絶する事以外の効果もある。 異形勢力に対処せずに世界結界を再構築した場合、数千年後の滅びは発生する。それを防ぐには、世界結界を再構築しないか、異形を全て滅ぼすかのどちらか。 世界結界の創造・修復には聖杯が不可欠。神の左手での代用の可否は不明。 世界結界の完全崩壊までの残り時間が決まっている訳では無い。いつ崩壊するかは、維持の仕方次第。 世界結界を永続的、かつ、強力に維持する方法は無い。また、今のまま維持する方法も無い。 ティンカーベルと、ティンカーベルの持ち物について ティンカーベルの持ち物となっているメガリスが復活する可能性はある。 封神台と神将について 封神台に登録されている「神将」を元の生命に戻す方法は無い。 封神台以外の方法で神将を存在させ続ける方法も無い。 封神台がイグニッションカードに入らなかった理由は、所有する力の量が違うから。 マヨイガについて マヨイガは特殊空間である「マヨイガ」を作り出すメガリス。 所有者は「クマソタケル」。代償により、クマソタケルは「視肉」となっている。 視肉を殺す事で、新たなマヨイガの所有者となる事は可能。 プラトン立体について プラトン立体は破壊されている。 闘神の独鈷杵について 九尾の女王「金毛九尾」が所有している。 鉄鎖レージングについて 九尾の女王「金毛九尾」が所有している。 殺生石について 生命を残留思念化する事ができる。代償などの情報は、聞かれたかった為に未回答。 鬼の手について 異形「生と死を分かつもの」の居場所に到達するには「90億3873万9217」の詠唱銀が必要。 燕の子安貝(ゾアン・クラム・アグゼ)について 銀誓館学園は「既に利用している」。 ゴーストについて ゴーストと異形の違いは、「二つの三日月」に近いかどうか。 ゴーストが「魂が肉体を凌駕する」事もあるのは、「魂が生命にしか宿らないという事はない」為。 ゴーストについての「何かを思い出す」には、世界結界を綻ばせれば良い。 異形、抗体ゴースト、生命死亡後に発生するゴーストは、それぞれ異なる存在。 ゴーストを人為的に、ゴーストとしての本能から解き放つ最も容易的、かつ、具体的な方法は使役ゴースト化。 生命が死後、生前の意識を完全に保ったままゴースト化する方法は存在しない。 抗体ゴーストと抗体兵器について 抗体ゴーストの総数は、現時点で「1286万7523体」。 抗体ゴーストを通常のゴーストに戻す事は、それが可能な抗体ゴーストのみ可能。使役ゴースト化は、その方法の一つ。 ナンバードを通常のリビングデッドに戻す事は不可能。 ナンバードの廃棄を行っている黒幕は存在しない。 能力者が抗体兵器を使う事はできない。詠唱兵器に組み込んで使うなどの、直接的では無い利用方法も存在しない。 抗体兵器の「抗体」は、この宇宙の異物である生命に対抗して発生したと言う意味。 異形について 異形とは、ゴーストの中でもディアボロスランサーの影響を強く受けたゴーストの事。 封印されても記憶を失わないのは、封印で記憶が消去されない為。 異形を完全に滅ぼす方法は、1.神秘根絶2.原初の吸血鬼の王の力を使うのどちらかのみで、それ以外の方法は存在しない。但し、これとは別に「宇宙に生命が満ちれば倒せる」との回答も。なお、「玉鋼の塗箱」で「原初の吸血鬼の王」の力を使う方法も存在する。 異形の本拠地は「生命の存在しない場所」にある。 異形が生命を滅ぼそうとする理由は、生命が侵略者だから。生命が増殖を止める事ができるのであれば、異形が生命根絶を止める可能性はある。 異形との和平は、それを求める人が多数となれば、そこに至る道が見えるだろう。 異形が神の左手を入手した場合、ディアボロスランサーの破壊を行うと推測される。 仮に異形と手を組んだ場合であっても、学園の能力者が変な姿に変わるような事は無い。 カースブレイドの本業能力で異形を「喰った」としても、滅ぼす事はできない。 二つの三日月について 異形の祖となる存在であり、異形の王と共に存在する。 ディアボロスランサーとは「因縁を持つ二者」と言う関係。 生と死を分かつものについて 鬼の手を使用する場合、「90億3873万9217」の詠唱銀で生と死を分かつものの元へ行く事が可能。 生と死を分かつものの元へ行く方法の内、最も危険の少ないルートは「転移門」を使う事。 現在はルールー(トゥルダク)により、戦力を増強している状態。 「生と死を分かつもの」よりも上位の異形は存在する。 生と死を分かつ役割ゆえの制約が課されている。 ディアボロスランサーの出現前には存在していなかった。 生と死を分かつものを滅ぼしても、それが異形全てを滅ぼす事にはならないが、滅ぼした場合、この世界に生命が満ちる事になるだろう。 無血宰相トビアスについて 性別は心の持ちよう次第。 水晶剣ルルモードについて 「転移門」としての力を持つ異形。「転移門」とは、かつてナイトメアが求めた「橋」であり、過去に来訪者が用いた事があり、遠く離れた地点を一瞬で移動する事ができるもの。 現在は凝縮された形状となっているものの、「転移門」としての機能は失っていない。 セイクリッド・ダークネスについて かつては「ジャンヌ・ダルク」が宿主だった。 異形「セイクリッド・ダークネス」の天啓と、聖杯による天啓(天啓巡礼士の天啓)の天啓の関連性は無い。 デッドエンドについて ゴーストでもあり、能力者でもある存在。 異形「無血宰相トビアス」の研究の成果。 「創造者(クリエイター)ジズ」「道楽者(ジョーカー)ベヒモス」は異形に与するデッドエンド。 デッドエンドデッドについて 「イグノートゥスカード」を得る事でなる事ができる。 デッドエンドデッドは既に死亡している。 妖狐について 現在は「世界征服」を目的にはしていない。種族の繁栄が目的。 伯爵を利用して、抗体ゴーストを配下とする方法は既に得ている。 所有するメガリスは、新たに「闘神の独鈷杵」「鉄鎖レージング」を所有を確認。 破壊効果「五行禁術」の効果は、既に説明がされている効果で間違いない。 七星将以上の戦力になる存在は、数名のみ存在する。 金毛九尾について 年齢は「3123」歳。 天空の戦いに参加した金毛九尾は本人ではなく、金毛九尾の「尾」の内の1体。 「大いなる災い」「不滅の災い」以外の残る平家のゴースト兵器(「霊亀」「応竜」)を所有している。 ジハードへの妨害の指示を行っていた。 吸血鬼について 「ゲーム」などの儀式以外の方法で、原初の吸血鬼となる方法は存在する。また、見えざる狂気に囚われずに原初の吸血鬼の力を得る事も可能であり、その方法の一つは「世界結界を破壊する事」である。他にも死者を出さずに原初の吸血鬼の力を得る方法もある。 原初の吸血鬼の王であれば、全ての異形を完全に滅ぼす事ができる。 伯爵について 本名は「バルキウム・リトアート」。年齢は「1724」歳。 善悪の彼岸の際に伯爵が呼び出した「ジャンヌ・ダルク」は、かつて、異形「セイクリッド・ダークネス」の宿主だった存在。 伯爵の特殊な力の強さは、個体差ではなく、別の力の源を持っているから。 土蜘蛛について 蜘蛛童が「死人嗅ぎ」に反応したり、「ゴースト再生手術」の対象になるのは、外殻がゴーストの性質を持つから。但し、本質は来訪者の為、土蜘蛛や鋏角衆などの生命に成長する事が可能。 ルナエンプレスと月の民について ルナエンプレス「カグヤ」は消滅している。 月は月人の本星。 月の民が地球に来れる時期は、意志次第。昔のように人が住めるようにするには、意志と努力と巡り合わせが必要。 月に緑を取り戻す事は可能。その為の技術を得ていけば良い。 平家について 「大いなる災い」「不滅の災い」以外の残る平家のゴースト兵器(「霊亀」「応竜」)は、妖狐の女王「金毛九尾」が所有している。 ナイトメアについて ナイトメアが求めていた《橋》は、転移門の事。 人狼について 人狼は「原初の吸血鬼の王」を滅ぼす為に、地球に訪れた。 ニーベルングの指輪による洗脳は、人狼が地球に訪れる前から行われていた。 生命使いと生命賛歌について 「生命使い」とは「生命賛歌」を用いる者達の事。 「生命賛歌」は、「ディアボロスランサー」の力と酷似した力である。 白燐蟲使い、黒燐蟲使いについて 白燐蟲や黒燐蟲は来訪者の一種。 除霊建築士について 「大逆門」や「奇門遁甲陣」などの徐霊建築士の技術の使用は、学園の除霊建築士でも不可能ではないが、非人道的な方法が必要。 朱雀拳士、玄武拳士について 「朱雀拳士」「玄武拳士」の本業能力は「王者の風」。 日本に「朱雀拳士」「玄武拳士」が暮らす集落や道場などは存在する。また、村と町と海岸にいる。 その他の能力者や来訪者について 学園と運命の糸が繋がっていない能力者、来訪者は、地球上と、それ以外に多数存在する。 今後、新たな来訪者が宇宙から訪れる可能性はある。また、その来訪者が、神の左手による神秘根絶を行う可能性もある。 インドに存在していた強力な能力者組織、ゴースト組織の情報はある。但し、詳細については回答なし。 「星のエアライダー」は存在しない。 月のエアライダーに対するルナエンプレスのように、太陽のエアライダーと対になるようなジョブは地球には存在しない。 来訪者が地球に来た方法は、転移門、あるいは通常の移動。 来訪者が元の世界に戻る事は可能。 使役ゴーストについて シャーマンズゴーストは、3万年活動すると「樹」になる。 スケルトンの蘇生、もしくは知識を取り戻すのは、トゥルダク(ルールー)であれば可能。 モーラットヒーローが更に別の形態に進化する可能性はある。 見えざる狂気について 見えざる狂気を発症した者を回復させるには、世界結界を完全に破壊すれば良い。 その他、未分類 「死の世界」というものは存在しない。 「魔術体」となった存在を、元に戻す事はできない。同様に「死者」を生前のままの状態にする事もできない。 ゴーストタウン「<忘却博物館>黄金の記憶」のアヌビスフェイクに掛けられた呪いを解く方法は「31にする」事。 「ナスカの地上絵」を描いたのはサンダーバード。 能力を持たない一般人は、何らかの目的の為に意図的に「作られた」存在。 アビリティの「超奥義」の習得は、生命の危機に瀕すれば、可能性はある。 過去を変える方法は無い。 能力者や来訪者が宇宙空間で戦う力は「持っている」。 覚醒ジョブや覚醒アビリティは存在する。 千年後まで生き延びる方法はある。 世界結界が崩壊した後に起き得る事は、生命とゴーストの戦い。 雨堂・盾哉を復活させる方法は無い。 詠唱銀は「この世界の力の源」の一つ。 日本にまだ未発見のゴーストタウンはある。 「人間と共存する意思」を持つ来訪者とゴーストを不当に迫害せず、同時に世界結界維持を担っていた一般人を保護し得る「平和的かつ現実的な方法」は存在しない。
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問182 ウイルス性肝炎(A型、B型、C型)に関する記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。 1 C型肝炎の感染経路は、非経口感染である。 2 B型肝炎ウイルスは、RNAウイルスである。 3 A型、B型、C型のいずれも、ウイルスが肝細胞を直接破壊して発症する。 4 B型肝炎ウイルスの抗体は、HBc → HBe → HBsの順で陽性化する。 5 C型急性肝炎の慢性化率は他の肝炎に比べて低い。 次の問題
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2021年6月23日 出題者:りこまま タイトル:「カリスマ営業」 【問題】 女は今月、同僚の中で一番大きな数字を叩き出し、給料が減ってしまった。 なぜ? 【解説】 + ... 風俗店で働く女。店が定期的に行っている感染症検査で高い抗体価が出てしまったので、 しばらく休んで治療することになり、翌月の給料が減ってしまった。 配信日に戻る 前の問題 次の問題
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風疹(ふうしん) 関連サイト 風疹|用語集・体験談|プレママタウン 風疹(ふうしん)|みんなの妊娠用語・出産用語辞典|-たまひよweb- 風疹抗体価検査|みんなの妊娠用語・出産用語辞典|-たまひよweb- 風疹-妊娠・出産のお金大辞典- 「風疹」 健康用語辞典 - MSNビューティスタイル 関連用語 感染症 インフルエンザ はしか 水ぼうそう りんご病 関連商品
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htmlプラグインエラー このプラグインを使うにはこのページの編集権限を「管理者のみ」に設定してください。 第4部 事態は、大きく捻じ曲がり、生まれ変わる。 「下水道編」 目的 ・『研究所』へ行き『抗体』と『P-ウィルス』を手に入れる 話 htmlプラグインエラー このプラグインを使うにはこのページの編集権限を「管理者のみ」に設定してください。
https://w.atwiki.jp/bioboon/pages/22.html
htmlプラグインエラー このプラグインを使うにはこのページの編集権限を「管理者のみ」に設定してください。 最終章 見えた終幕は『光』か?『闇』か? 「研究施設編」 目的 ・『研究所』へ行き『抗体』と『P-ウィルス』を手に入れる 話 htmlプラグインエラー このプラグインを使うにはこのページの編集権限を「管理者のみ」に設定してください。
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名前 旭鳳 獅音(ぎょくほう れおん) 年齢 42 性別 男 所属 根上研究所 使用Venom [トリック] ソード/旧型 設定 Venom関連の事故に巻き込まれて、その事故により抗体を持つことがわかった 事故に巻き込まれた割にはVenomに対する恨みやなんやは特にないらしい Venomに関する研究を行っている人間で、彼は戦ったりVenomの回収に回ったりすることは滅多にない。 裏設定 有
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COVID-19ワクチン接種後に体内で起きる事 / 血液脳関門 (※mono....ウイルス【SARS-CoV-2】の存在を前提にした論文。ワクチンのスパイク蛋白質には触れていないが、このページに掲載しておく。注ーーー速報ジャーナル誌BBR(Biochemical and Biophysical Research Communications)Cに掲載の記事、ということで。) ※ 下記tweetスレッド 「SARS-CoV-2スパイク蛋白S1サブユニットを介したβセクレターゼ1(BACE1)の増加はヒト脳血管細胞を損傷させる」https //t.co/FIU9cTyTv2 — DR. DOGGIE (@sabuchanhakoda1) November 17, 2022 ◆ SARS-CoV-2 spike S1 subunit protein-mediated increase of beta-secretase 1(BACE1)impairs human brain vessel cells SARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質を介したβセクレターゼ1(BACE1)の増加によるヒト脳血管細胞の障害について ハイライト SARS-CoV-2は内皮細胞を障害し、細胞の老化を誘導する。 SARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質はBACE1発現を誘導する。 BACE1発現の増加は、血管の完全性障害と老化をもたらす。 概要 COVID-19感染者は,脳血管障害(CVD)や神経症状を含む心血管系疾患に罹患し続けており,その回復が不完全であることを示す証拠が増えつつある.最近の知見では,重症急性呼吸器症候群コロナウイルス2(SARS-CoV-2)感染によるダメージの一部,特に脳への影響は,スパイクタンパク質によって誘導され,初期の血液脳関門(BBB)の破壊につながる可能性があることが示されている.SARS-CoV-2感染細胞および動物では、年齢依存的な病原性が認められる。本研究では、SARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質によって誘導されるBBB破壊と細胞老化の重要なメディエーターとして、内皮BACE1を同定した。ヒト脳微小血管内皮細胞(HBMVEC)においてBACE1が増加すると、ZO-1、オクルディン、クローディンなどのタイトジャンクションタンパク質のレベルが低下することが判明した。さらに、BACE1の過剰発現は、細胞の老化の典型的な特徴であるp16とp21の蓄積をもたらす。本研究の結果、SARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質は、HBMVECにおいてBACE1の発現を上昇させ、内皮漏出を引き起こすことが明らかとなった。さらに、SARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質は、p16およびp21の発現を誘導し、BACE1を介した細胞老化を示すことが、HBMVECのβ-Gal染色により確認された。以上、本研究により、BACE1を介した内皮細胞障害および老化がCOVID-19感染後のCVDと関連する可能性が示された。 キーワード SARS-CoV-2COVID-19BACE1脳血管細胞老化 1. はじめに 重症急性呼吸器症候群コロナウイルス2型(SARS-CoV-2)に感染した患者の多くは、初感染から回復した後も疲労感や認知障害、あるいは脳血管障害(CVD)を含む心血管疾患を発症することが最近の研究で明らかにされている(総称して long-COVID と呼ばれる)。一部の患者は感染後7ヶ月でもそのような症状を示し、long-COVIDに苦しみ続けます[1]。これは、スパイクのS1サブユニット、完全長スパイク、ヌクレオキャプシドを含むSARS-CoV-2抗原が持続的に残存していることと関連します[2]。最近の研究では、長いCOVIDによる認知障害は、20年に相当する加速度的な老化に相当することが実証されています[3,4]。SARS-CoV-2感染動物[5]やCOVID-19患者[6]では、加齢に伴う発症が観察されています。臨床研究によると、COVID-19患者の約30〜50%が長いCOVID症状を経験し、これは年齢や女性性が高くなるにつれて一般的である[7]。 SARS-CoV-2は、S1サブユニットを介して細胞に感染し、標的細胞上のACE2と結合する[8]。ACE2は肺、心臓、腎臓、脳、腸などの複数の臓器で発現しており、COVID-19患者の肺や脳を含む肺外の複数の臓器でウイルス要素が検出された[9]。COVID-19患者のいくつかの臓器からの組織学的データは、SARS-CoV-2が内皮細胞に直接感染する証拠を示している[10]。最近の研究では、SARS-CoV-2スパイクS1タンパク質が血液脳関門(BBB)を通過して脳実質に移行し、BBB障害を引き起こすことが示唆されている[11]が、BBB機能障害に関わるメカニズムは十分に検討されていない。 BACE1はアスパラギン酸プロテアーゼであり、細胞外ドメインに2つのアスパラギン酸残基の活性部位を持つ膜貫通型タンパク質である。また、βセクレターゼとして知られており、γセクレターゼと協力して、アルツハイマー病(AD)患者の脳に蓄積するアミロイド前駆体タンパク質(APP)を切断してアミロイドベータ(Aβ)を産生することが知られている。BACE1が脳血管内皮細胞のタイトジャンクションの完全性の喪失を誘導することを示す証拠が増えつつある[12]。脳アミロイド血管障害(CAA)の死後ヒト脳の微小血管では,BACE1の上昇が観察される[12].内皮BACE1活性の異常は、内皮機能障害や記憶障害を誘発する[13]。したがって、内皮BACE1の発現増加は、タイトジャンクションタンパク質の喪失によるBBB崩壊と関連している可能性がある。 本研究では、SARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質が、BACE1がupregulationしているヒト脳血管のタイトジャンクションタンパク質の完全性を崩壊させることを確認した。BACE1を阻害すると、SARS-CoV-2スパイクS1サブユニット蛋白質による内皮細胞の漏出が阻止された。さらに、SARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質によるBACE1のアップレギュレーションは、細胞の老化に関連するβ-gal、p62、p21の蓄積を引き起こすことがわかった。これらの結果から、SARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質による内皮BACE1が血管漏出と内皮老化を媒介し、脳血管の機能を低下させ、結果として脳卒中や出血などのCVDを引き起こす可能性があることが示された。 2. 材料と方法 2.1. 試薬 抗BACE1(CS-5606)抗体および老化β-ガラクトシダーゼ染色キット(CS-9860)はCell Signaling Technology(Beverly, MA, USA)から、抗p16(sc-1207)および抗p21(sc-756)抗体はSanta Cruz Biotechnology(サンタクルーズ、カリフォルニア、米国)から、抗occludin(ab31721)抗体はAbcam(ケンブリッジ、MA、米国)から、入手した。抗ZO-1(61-7300)、抗クラウディン-1(37-4900)、および抗クラウディン-5(35-2500)抗体は、Invitrogen(Carlsbad、CA、USA)より購入した。抗β-アクチン(A5316)抗体は、Sigma(Saint Louis,MO,USA)から入手した。SARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質(10522-CV)は、R&D Systems(Minneapolis、MN、USA)から購入した。β-セクレターゼ阻害剤IV(BI-IV;565788)および血管透過性アッセイキット(ECM644)は、EMD Millipore(Temecula、CA、USA)より購入した。 2.2. 細胞培養 ヒト脳微小血管内皮細胞(HBMVECs)は、Cell Systems社(Kirkland, WA, USA)から購入した。HBMVECは、20%FBS、3ng/mL組換えヒト線維芽細胞増殖因子-基本(FGF-b;ミリポア、テメキュラ、カリフォルニア、米国)、5U/mLヘパリン、ペニシリン(100U/mL)およびストレプトマイシン(100μg/mL)で補充したM199培地で培養された。ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVECs)はLonza(Walkersville, MD, USA)から購入した。HUVECは、完全なサプリメント(EGM-2 bullet kit, Lonza)を含む細胞増殖培地(EGM-2, Lonza)中で増殖させた。細胞は、37℃、5%CO2の加湿雰囲気下で維持した。 2.3. イムノブロット プレートで培養した細胞をリン酸緩衝生理食塩水(PBS)で洗浄し、RIPAバッファーで溶解させた。細胞溶解液を遠心分離し(13,000rpm、30分、4℃)、ブラッドフォードタンパク質アッセイで製造元のプロトコルに従って濃度を測定した。タンパク質を4-12%NuPAGEゲル(Invitrogen)で分離し、ニトロセルロース膜に移した。膜は5%スキムミルクと0.1%Tween 20を含むトリス緩衝生理食塩水でブロックし、一次抗体とともに4℃で一晩インキュベートした。洗浄後、膜は二次抗体とインキュベートされた。タンパク質は化学発光キット (Amersham Pharmacia Biotech, Buckinghamshire, UK, USA) で検出した。以下の一次抗体を用いた;抗ZO-1(1:1000)、抗p16(1:1000)、抗p21(1:1000)、抗occludin(1:1000)、抗claudin-5(1:1000)、抗claudin-1(1:1000)、抗BACE1(1:1000)および抗β-actin(1:5000)。 2.4. 2.4. 細胞へのトランスフェクション pCMV-MycベクターにクローニングしたヒトBACE1で細胞を一過性にトランスフェクションした。トランスフェクションには、Lipofectamine LTX試薬とOpti-MEM培地(Life Technology, Grand Island, NY, USA)をメーカーの説明書に従って使用した。 2.5. 血管透過性アッセイ 血管透過性アッセイキットを、製品の説明書に従って透過性アッセイに使用した。簡単に説明すると、HBMVECを24トランスウェルプレートの1μm孔サイズのメンブレンインサート上に播種し、500μlの完全培地で満たした24トランスウェルプレートに移した。コンフルエント(100%)になった時点で、HBMVECをSARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質で24時間処理し、その後、高分子量のFITC-Dextranを含む完全培地を細胞に補充した。インサートの膜を越えて移動したFITC-Dextranを24トランスウェルプレートで20分間回収し、移動したFITC-Dextranを含む100μl容量の培地を清浄な96ウェルプレートに入れて485nmで蛍光測定した。 2.6. 老化関連β-ガラクトシダーゼアッセイ 老化したHBMVECは、製造者の説明書に従って、老化関連β-ガラクトシダーゼ(SA-β-gal)染色キット(Cell signaling)により検出された。簡単に説明すると、SARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質とインキュベートしたHBMVECを0.2%グルタルアルデヒドで室温で15分間固定し、β-gal染色液中で37℃にて一晩インキュベートした。老化細胞は、標準的な光学顕微鏡(Olympus, Tokyo, Japan)下でのβ-gal溶液の青色染色によって同定された。陽性染色を定量化するため、標準偏差を得るために、各サンプルについて、いくつかの視野で100個以上の細胞を数えた[14,15]。 2.7. 免疫蛍光アッセイ 細胞はPBSで素早く洗浄し、直ちにPBS中4%パラホルムアルデヒドで37℃、15分間固定し、PBSで3回洗浄した。細胞は100%氷冷メタノールで室温で10分間透過処理した。細胞をPBSで再洗浄し、4%ウシ血清アルブミンで1時間ブロックし、一次抗体(抗ZO-1、1:200)と共に一晩インキュベートした。一晩インキュベートした後、蛍光剤結合二次抗体を45分間適用し、カバーガラスで密封した。染色は、蛍光顕微鏡(Zeiss, Jena, Germany)を用いて確認した。 2.8. 統計解析 結果は平均値±S.D.で表した。グループ間の有意差の解析には、Student's t-testを適用した。 3. 結果 3.1. SARS-CoV-2 スパイク S1 サブユニットタンパク質はヒト脳微小血管の制御を異にする SARS-CoV-2 spike S1 subunit proteinを24時間暴露したHBMVECにおいて、BBB形成に必須の成分であるZO-1、オクルディン、クローディンの発現を評価し、脳血管の健全性に及ぼす影響について検討した。その結果、SARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質は、HBMVECのZO-1、オクルディン、クラウディン-5の発現を低下させることがわかった(図1A)。免疫蛍光染色により、ZO-1陽性細胞はSARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質の存在下で消失することが明らかになった(図1B)。さらに、SARS-CoV-2スパイクS1サブユニットタンパク質に24時間暴露すると、血管透過性が上昇した(図1C)ことから、ヒト脳微小血管の調節異常が示唆された。 ※mono....まだまだ続くので後ほど全機械翻訳予定。DR. DOGGIE氏の一連のtweetを読んでいただいた方が分かり易いかも。 ※参考記事 ■ みんな一度は通る道?とりあえずBBRC。 「環境バイオテクノロジー研究室の講義ファイルと研究アーカイブス(2019年6月29日土曜日)」より ドイツの学会で遺体解剖経験40年の医師が講演 mRNAワクチン接種後に急死した人の脳細胞がスパイク蛋白を生成した事実を画像と共に説明する おそらく人格に影響を与えるレベルだと示唆 https //t.co/4sdg0EFNQ7 — みたま🇯🇵 (@int_independent) October 10, 2022 .
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https://w.atwiki.jp/bioboon/pages/9.html
htmlプラグインエラー このプラグインを使うにはこのページの編集権限を「管理者のみ」に設定してください。 第三部 加速した事態は、大きく捻じ曲がる。 「VIP博物館編」 目的 ・『研究所』へ行き『抗体』と『P-ウィルス』を手に入れる 全42話 ・173話~213話 htmlプラグインエラー このプラグインを使うにはこのページの編集権限を「管理者のみ」に設定してください。