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In order to do one point mutation 1. look for the restriction enzyme around the place you want to insert. 2.check that is unique. 3. Quick change mutagenesis manual the appropriate amount of vector for retransformation I am gonna add 50 ng. trouble shooting link1 electrophoresis Vector and primers pcDNA3 eclectic vector and primers
https://w.atwiki.jp/popnmiddle/pages/89.html
NORMAL HYPER EX Level 3 5 9 Objects 183 220 429 BPM 181 Artist Ryu☆ 楽曲概要 AC版ポップンの収録はACSP。ジャンル名は「ハッピーハードコア」。 解禁方法 「jubeatパック1」を購入する。 動画 http //www.nicovideo.jp/watch/sm24021655 EX S 攻略 各難易度ごとに[N]・[H]・[EX]で区別して記入してください 50ノーツ目付近の２個押し→１個押しの繰り返し地帯は単純な８分ではなく、タッタタッタ、タッタタッタというリズムの繰り返し。視認しにくいので注意 -- 名無しさん (2014-07-17 12 23 13) 226～230ノーツはなぜか歯抜けリズムになっている。 -- 名無しさん (2014-07-17 12 25 30) 名前 コメント コメント(感想など) 名前 コメント
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【登録タグ H ゆーと キッドP ワタヤノボル 初音ミク 曲】 作詞：ゆーと（格闘少年P） 作曲：キッドP 編曲：ワタヤノボル 唄：初音ミク 曲紹介 グリム童話モチーフコンピレーションCD『GRIMMLOID』収録曲。 モチーフ元は「七羽のカラス」。 作詞をゆーと（格闘少年P）氏、作曲をキッドP、アレンジをワタヤノボル氏、イラストをKATSUO氏、動画をにこげ氏がそれぞれ担当している。 歌詞 （PIAPROより転載） 願い叶うことがすべて 幸せには繋がらぬ 闇を纏う 身体七つ 大空へ 飛び出す あぁ 無情な 世界に墜とされた くるり その身を翻して 旅立つ少女（ひと） 中傷をただ盗み聞いて自分を責める日々に別れ 世の果てで見た光と陰 その場所はもう何も無い 求めては返す時間（とき）の流れ ガラスの山の入口で 無くしたものの代わりにと 強かな手を差し出した 君は何を求めている 言葉も無く寄り添って 見たことない 場所がそっと 静寂に 呑まれた ねぇ こころを 忘れないでいてね 今も その身に潜めている 確かなもの 過ぎ去りし日々残したもの 彼女は闇にさらわれたの？ 見ることの無い未来と過去 消えゆくものに用はない 何もかも 置いてゆきたくなる 烏の山の頂で 自分を思い出してねと 希望をひとつ忍ばせた あぁ こころを 取り戻したんだね くるり その身を翻して 旅立つ人間（ひと） 涙の雫伝う頬 いつしか闇は明けていった 優しく揺れる光と陰 まるで対極（べつ）のもののように 響き合う 舞い散る風の音 嗄らす叫びによく似てる 終わりを告げるかのように 願いが空に飛び込んだ コメント 追加乙！ -- 名無しさん (2013-09-28 16 27 47) 名前 コメント
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GENRE TITLE ARTIST bpm notes CLEAR RATE HOUSE Happy Wedding ASKA 126 940 n%（yyyy/mm/dd） 攻略・コメント クリア自体はそう難しくないが、全体的にオブジェがとにかくズレにズレまくっており、スコアが出にくい。ズレを気にしすぎて思うようにクリアできない可能性も出てくるので、その場合はスコアを度外視してミスを出さないことだけに集中しよう。その昔この曲をフルコン（ノーミス？）で演奏すると、終盤のムービー部分に特殊レイヤーが出現することで話題になった。今現在出すことができるかどうかは筆者未確認です、申し訳ない。 -- 名無しさん (2010-07-19 03 12 39) 餡蜜非推奨。譜面に忠実に、曲のリズムに合わせて打たない方がいい。……最近フルコンしたのだが、レイヤーに目を向けられなかったorz -- 名無しさん (2011-11-02 16 48 35) ↑の者だけど、カード無しで再度フルコンしたけど特殊レイヤーは無いみたい。フルコンネックはズレよりトリル。 -- 名無しさん (2011-11-15 17 06 40) 特殊レイヤーどころか普通のレイヤーも死んだな -- 名無しさん (2013-09-24 21 59 41) ムービーが・・・復活とかないかなぁ/// -- 名無しさん (2013-12-10 21 50 14) BPMは遅めだがブレイク前後に一度ずつ出てくる24分トリルが危ない。序盤も結構ごちゃごちゃしているため、ハードは地雷には遠いが少し難しめ。後半は割と楽なのでノマゲに限ればエキストラ召喚にもおすすめ、この曲を皮切りにズレに慣れていくのもいいかも -- 名無しさん (2014-09-11 20 32 54) 超スコア難曲。これで鳥Aを取れるならば、☆8の曲のほとんどは鳥を取れるはず。MAX-は皆伝でも限られてきます -- 名無しさん (2015-07-26 21 10 17) 序盤のごちゃごちゃした部分は☆8上位レベルの密度があるのでハード以上は24分トリルと同様注意する必要がある。それ以外は微ズレで認識負荷が強かったりスコアが出なかったりするが☆8入門レベルなのでノマゲまでなら簡単。 -- 名無しさん (2017-09-21 09 16 58) クリア難度は妥当だけどスコア難度はとんでもなく高い 下手な１２より圧倒的にスコアが出ない -- 名無しさん (2018-07-18 13 14 40) 餡蜜するつもりがなくても勝手に同時押し餡蜜処理になるそんな譜面 -- 名無しさん (2018-07-18 15 20 47) 名前 コメント
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イベントよみがな： すとーりー おぶ あんはっぴー がーる 参加メンバー： ハウ ン・メモリー・ディエゴ・ルオ 舞台：洋館 時間軸：夜 プロローグ： エピローグ： ＵＲＬ：http //jbbs.livedoor.jp/bbs/read.cgi/otaku/10950/1306587545/t
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Happy Tree Friends False Alarm 項目数 12 総ポイント 200 難易度 Beginner's Luck Complete the tutorial 5p Just what the doctor ordered Finish a zone without harming any Happy Tree Friends 10p Sweet Smell of Copper Achieve a Bronze Award 10p The Midas Touch Achieve a Gold Award on each level 30p Playing With Fire Burn 200 characters to death 5p Piece of Cake Achieve at least a Bronze Award in 15 levels 20p You Da Bomb Achieve a career score of at least 18,000,000 25p The Last Drop Finish a zone with all the characters under 25% health 10p That’s a Wrap Unlock the 2nd part of the movie 25p Give Yourself A Hand Score at least 500,000 in every level 25p Hi Ho Silver Achieve a Silver Award 15p You're Golden Achieve a Gold Award 20p
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LSS/WE27-A15 カード名：“HAPPY PARTY TRAIN”黒澤 ルビィ カテゴリ：キャラクター 色：青 レベル：2 コスト：2 トリガー：1 パワー：8500 ソウル：1 特徴：《音楽》 【自】 アンコール ［あなたの山札の上から1枚をクロック置場に置く］ （このカードが舞台から控え室に置かれた時、あなたはコストを払ってよい。そうしたら、このカードがいた枠にレストして置く） レアリティ：TD ラブライブ！サンシャイン!! ラバーマット＆ヴァイスシュヴァルツおためしデッキセット 収録 ・同名カード カード名 レベル/コスト スペック 色 備考 “HAPPY PARTY TRAIN”黒澤 ルビィ 2/2 7500/2/1 黄 トライアルデッキ＋ ラブライブ！サンシャイン!!? 収録
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編集途中 ② ③ ⑦ ⑦ ① － ② － ④ ③ ⑤ ⑦ ③ － － － ③ ⑦ ⑥ ④ ⑤ ⑥ － ① ③ ⑦ ⑦ ⑦ － － － ⑤ ⑥ ⑪ ① ② ③ ④ ⑦ ⑧ ⑨ ⑤ ⑥ ⑦ ⑧ ③ ④ ⑪ ⑩ ⑨ － ⑩ － ① ② ⑪ － － － ②③⑦⑦ |①|－|②|－| ④③⑤⑦ |③|－|－|－| ③⑦⑥ |④|⑤|⑥|－| ①③⑦⑦ |⑦|－|－|－|
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Widappy メンバー 有名人 もとい芸能人
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Happy Peace 詳細・攻略 アニメスペシャルのみの収録。 ★×7で401コンボ。精度曲である。BPMは169 vocalはDragon Soulやヒカリノカナタヘ等でお馴染みの谷本貴義。 作曲は画竜点睛シリーズでお馴染みの西込加久見。 プレイ動画 かんたん ふつう むずかしい コメント 譜面 連打の長さは適当です。